Verbundprojekt B-Zell-Immun: Hochdurchsatz-Analyse virusspezifischer Memory-B-Zellen zur Bestimmung individueller Immunantworten; Teilvorhaben: Miniaturisierte Arrays und Hochdurchsatz-Plattform

Abstract

Das wesentliche Ergebnis für LPKF ist die Realisierung des "localized ELISPOT" genannten Assays zur Identifikation von einzelnen Antikörper-sezernierenden Zellen. Das Assay basiert auf dem ELISPOT zur Detektion von Zelleigenschaften in Kultur und der Möglichkeit von angepassten Glas-Microwells, Zellen einzeln und lokalisiert zu untersuchen. Für die Realisierung des localized ELISPOT hat LPKF verschiedene Workflows im eigenen Biolabor etabliert. Dazu gehören: Einfärben von Zellen zur Detektion von Zelltypen und Unterscheidung von toten und lebenden Zellen sowie Zellkultivierung und -lagerung. Parallel lag der Fokus auf den Fähigkeiten der Demonstrator-Anlage: dem Drucken von selektierten Einzelzellen in Microwells, der KI-basierten Analyse von Zellen (Überwachung der Viabilität, Erkennung von Zelltypen, Zählen von Zellen) sowie der Entnahme von selektierten Einzelzellen aus Kulturen in Microwells. Die Möglichkeiten des LIFT-Verfahrens zur Übertragung von lebenden Zellen in Microwells wurden zusammen mit dem ILT untersucht. Die Ergebnisse konnten aufgrund einer Verschiebung der Prioritäten auf Zelluntersuchungen nicht in die Anlage bei LPKF integriert werden. LIFT wurde durch das ILT als eigenständiger Schritt innerhalb der Prozesskette demonstriert.